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說明: AMFP胎牛血清是款適用于常規(guī)細(xì)胞系、傳代細(xì)胞系及部分原代細(xì)胞的培養(yǎng)的優(yōu)級胎牛血清適用細(xì)胞類型:293、293T、CHO、Vero、SF-9等傳代細(xì)胞Hela、A549、HepG2、MCF-7、HeDG2等腫瘤細(xì)胞MRC-5、KMB-17、2BS等二倍體細(xì)胞乳腺癌細(xì)胞(MDA-MB-231)、鼻咽癌細(xì)胞(NPC;SUNE1;CNE1;CNE2;HNE1;HONE1:HNE2;TW03)、結(jié)腸癌(CT-26;HCT116;HT-29;HCT8;LoVo;MC38)、胰腺癌(Panco2)、膀胱痘(T24)、肝細(xì)胞(Huh7)等腫瘤細(xì)胞;B細(xì)胞、SP2/0等骨髓瘤細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞;本血清血源源自非疫區(qū)的南美,并在南美加工生產(chǎn),產(chǎn)品經(jīng)3級100nm過濾,符合國際知名胎牛血清檢測標(biāo)準(zhǔn)。適用于部分原代細(xì)胞及其他細(xì)胞的培養(yǎng)。原裝進(jìn)口、高質(zhì)低價。1.內(nèi)毒素含量≤5EU/ml2.血紅蛋白含量≤0.02%(w/v)3.促細(xì)胞生產(chǎn)曲線峰值>1.5x106/ml4.細(xì)胞倍增時間<16小時5.細(xì)胞克降率>85%6.BVD、PI3、IBR檢測均為陰性(未檢出)
說明: 二甲基亞砜,英文名稱DMSO。常用于溶解試劑。二甲基亞砜(DMSO)是種含硫有機(jī)化合物,分子式為(CH3)2SO,常溫下為無色無臭的透明液體,是種吸濕性的可燃液體。具有高極性、高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性好、非質(zhì)子、與水混溶的特性,能溶于乙醇、丙醇、苯和氯仿等大多數(shù)有機(jī)物,被譽(yù)為“萬能溶劑”。 二甲基亞砜(DMSO)不能使用PS、PVC、PC材料的容器,而應(yīng)該使用LDPE、HDPE、PP材料的容器。DMSO屬于非質(zhì)子極性溶劑,常用于化學(xué)反應(yīng)、pcr反應(yīng)以及在細(xì)胞、組織和器官的保存中用作玻璃化低溫冷凍防護(hù)劑。DMSO用于細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基內(nèi),可以保護(hù)細(xì)胞免受冰晶引起的機(jī)械性損傷。它也可以用于主培養(yǎng)、亞培養(yǎng)、重組異倍體、雜交瘤等系列細(xì)胞株,胚胎干細(xì)胞(ESC)和造血干細(xì)胞的冷凍保藏。另外常常與BSA或FBS混合使用。
說明: ECL Western Blotting Substrate 【保存條件】 4℃避光保存 12 月 【概述】 超敏發(fā)光液用于檢測直接或間接標(biāo)記辣根過氧化物酶 HRP 的抗體及其關(guān)聯(lián)的抗原。 用于 HRP 標(biāo)記抗體的 Western Blot 和 HRP 標(biāo)記探針的核酸雜交。由于采用了獨(dú)特的發(fā)光底物 系統(tǒng),SuperStar ECL 超敏發(fā)光液是目前靈敏的商業(yè)化熒光 ECL 檢測試劑(具有極高靈 敏度和高信噪比);可在日光燈下進(jìn)行發(fā)光操作;發(fā)光迅速,熒光可使 X 光膠片感光達(dá) 12 小時以上,特別適用于痕量蛋白或核酸檢測;可使用更高的抗體釋倍數(shù)(1:2000~1:10000), 極其節(jié)省抗體。 【特點(diǎn)】 ? 飛克級靈敏度 - 在硝酸纖維素或 PVDF 膜上檢測低至飛克量的目標(biāo)蛋白量 ? 高信號穩(wěn)定性 - 孵育印跡在關(guān)鍵的 4 小時時間內(nèi)提供穩(wěn)定的信號持續(xù)時間,在佳條 件下可產(chǎn)生長達(dá) 24 小時的光輸出 ? 穩(wěn)定的試劑 - 8 小時工作溶液穩(wěn)定性; 在 4℃下 1 年的試劑盒穩(wěn)定性 ? 更經(jīng)濟(jì)的抗體用量: 0.2 至 1.0μg/ mL 抗(從 1 mg / mL 原液中 1:1000 至 1:5000 釋) 10 至 50 ng / mL 二級抗體(從 1 mg / mL 原液中 1:20,000 至 1:100,000 釋) 【操作方法】 1. 執(zhí)行常規(guī) SDS-PAGE、轉(zhuǎn)膜和 Western Blot 步驟。注意用 HRP 標(biāo)記 lgG 或用抗-鏈 親和素-生物素-HRP 夾法。2. Western Blot 后次洗膜的同時新鮮配制發(fā)光工作液:分別取 A:B=1:1 混合(如要 1ml 發(fā)光液則取 500ul ECL A 液和 500ul ECL B 液混合),放入干凈容器中混合。建議立即使用 工作液,室溫放置數(shù)小時后仍可使用但靈敏度略有降低。 3. 用鑷子取出膜,搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜完全干燥。將膜完全浸入發(fā)光工作液 (0.125ml 發(fā)光工作液/cm2 膜)中,與發(fā)光工作液充分接觸。室溫孵育 2 分鐘,準(zhǔn)備立即壓片 曝光。孵育時間過長不會增加靈敏度,有時還會導(dǎo)致曝光條帶異常。發(fā)光過程的本質(zhì)是酶促 反應(yīng),使用過少的發(fā)光工作液不利反應(yīng)進(jìn)行,也會導(dǎo)致膜上條帶曝光不均和明顯降低靈敏度。 為達(dá)節(jié)約目的可將 膜剪小但勿降低發(fā)光液用量。 4. 用鑷子夾起膜,搭在濾紙上瀝干發(fā)光工作液。但勿洗去發(fā)光液。 5. 打 X 光膠片暗盒,在暗盒內(nèi)表面鋪張面積大于膜的保鮮膜。將 Western Blot 膜貼在 保鮮膜上,將保鮮膜折起來完全包裹 Western Blot 膜,去除氣泡和皺褶,可剪去邊緣部多余 的保鮮膜。用濾紙吸去多余的發(fā)光工作液。用膠帶將覆蓋 Western Blot 膜的保鮮膜固定在暗 盒內(nèi),蛋白帶面向上。 6. 暗房內(nèi)壓 X 光膠片,分別曝光不同的時間如數(shù)秒到數(shù)分鐘。顯影沖洗。 【注意事項(xiàng)】 1. 步驟 1~5 可在日光燈下操作;但發(fā)光液曝露于強(qiáng)光下時間過久靈敏度可能略有降低,移 到暗房操作可避免之。戴手套可以避免在膜上留下手印。2. 長時間曝光或蛋白過量,將加深背景并使條帶強(qiáng)弱變化失去線性關(guān)系。曝光不足則條帶 模糊。3. 發(fā)光工作液孵育約 2 分鐘后膜上的條帶發(fā)光。強(qiáng)條帶發(fā)光在暗房中肉眼可見,低豐度蛋 白條帶 發(fā)光較弱甚至肉眼不可見但可使 X 光膠片曝光。不能簡單以肉眼觀察判斷條帶發(fā) 光時間。肉眼不可見的熒光實(shí)際上可持續(xù)數(shù)小時并使 X 光膠片感光,因而弱帶可曝光 1-10 小 時。如果曝光后條帶不佳,可用洗膜緩沖液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用 ECL 發(fā)光和 曝光。4. 由于超敏發(fā)光液極其靈敏,強(qiáng)烈推薦大多數(shù)進(jìn)口抗體起始濃度為抗 1:1000~1:4000, 二抗 1:2000~1:5000??贵w濃度過高將造成高背景或沒有條帶,導(dǎo)致失敗。5. 某些保鮮膜包裹印跡膜時可能會淬滅熒光,應(yīng)選擇高質(zhì)量保鮮膜。 6. 使用肉眼可見的預(yù)染色蛋白 Marker 和熒光-放射自顯影曝光標(biāo)簽可精確確定膠片上條帶 的位置和大小。7. NaN3能抑制 HRP 活性,回收第二抗體應(yīng)避免使用 NaN3,如必使用勿超過 0.01%。
說明: Aomabio/奧瑪胎牛血清(標(biāo)準(zhǔn)級)產(chǎn)自國內(nèi)優(yōu)質(zhì)血源地,經(jīng)嚴(yán)格的原料地篩選、原料初篩,原料質(zhì)量上乘可靠;在先進(jìn)的生產(chǎn)工藝和嚴(yán)苛的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)下,批間差異小、性能穩(wěn)定、品質(zhì)優(yōu)異;同時貨源充足,供應(yīng)穩(wěn)定。
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