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說明: 細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑盒(CCK-8),增強型【產(chǎn)品編碼】210817/210818 【包裝規(guī)格】 產(chǎn)品組成210818/500T210818/1000TCCK-8 增強型溶液5ml 10ml 說明書 1份 1份 【產(chǎn)品簡介】CellCounting Kit-8(簡稱CCK-8),是種基于WST-8面廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒。CCK-8試劑中含有WST-8(化學(xué)名:2-(2-甲氣基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基茉基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2日-四唑單鈉鹽)是種類似于WTT的化合物,它在電子耦合試劑1-甲氧基-5-甲基吩臻錯硫酸二甲酯(1-Wethoxy PMS)存在條件下,可以被線粒體內(nèi)的股氫酶還原為具有高度水溶性的橙黃色甲珊產(chǎn)物Formazan(參考圖1),生成的Forazan數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。因此可利用這特性直接進行細(xì)胞增殖和毒性分析,細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深:細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。 【操作步驟】、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(測定細(xì)胞具體數(shù)量)制備細(xì)胞懸液:細(xì)胞計數(shù)。K2.接種到96孔板中:按比例(例如:1/2比例)依次用培養(yǎng)基等比釋成個細(xì)胞濃度梯度,般要做3-5個細(xì)胞濃度梯度,每組3-6個重復(fù)孔。每孔100L細(xì)胞懸液。3.37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng):細(xì)胞接種后貼大約要培養(yǎng)2-4小時,如果不要貼這步可以省去。4.每孔加入10HLCCK-8增強型溶液:由于每孔加入CCK-8量比較少,有可能因試劑沾在孔壁帶來誤差,建議在加完試劑后輕輕敲擊培養(yǎng)板以幫助混,或者直接配制含10%CCK-8的培養(yǎng)基,以換液的形式加入。注意不要在孔中生成氣泡,以免彤響吸光摩的檢測5.培養(yǎng)箱內(nèi)孵育定時間后測定450nm吸光度,制作出條以細(xì)胞數(shù)量為橫坐標(biāo)(X軸),吸光度為縱坐標(biāo)(Y軸)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線可以定出未知品的細(xì)胞數(shù)量(使用此標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提是實驗的條件要致,便于確定細(xì)胞的接種數(shù)量以及加入CCK-8后的培養(yǎng)時間)。便捷程度細(xì)胞活性檢測1、制備細(xì)胞懸液:細(xì)胞計數(shù)。2.接種到96孔板中:根據(jù)合適的鋪板細(xì)胞數(shù),每孔100HL細(xì)胞懸液,可設(shè)置3個重復(fù)孔3.37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng):細(xì)胞接種后貼壁大約要培養(yǎng)24h小時,如果不要貼壁這步可以省去。也可以根據(jù)實驗要求的不同,培養(yǎng)相應(yīng)的時間。4,每孔加入10HL CCK-8增強型溶液由于每孔加入CCK-8量比較少,有可能因試劑沾在孔壁帶來誤差,建議在加完試劑后輕輕敲擊培養(yǎng)板以幫助混?;蛘咧苯优渲坪?0%CCK-8的培養(yǎng)基,以換液的形式加入,注意不要在孔中生成氣泡,以免影響吸光度的檢測。
說明: 二甲基亞砜,英文名稱DMSO。常用于溶解試劑。二甲基亞砜(DMSO)是種含硫有機化合物,分子式為(CH3)2SO,常溫下為無色無臭的透明液體,是種吸濕性的可燃液體。具有高極性、高沸點、熱穩(wěn)定性好、非質(zhì)子、與水混溶的特性,能溶于乙醇、丙醇、苯和氯仿等大多數(shù)有機物,被譽為“萬能溶劑”。 二甲基亞砜(DMSO)不能使用PS、PVC、PC材料的容器,而應(yīng)該使用LDPE、HDPE、PP材料的容器。DMSO屬于非質(zhì)子極性溶劑,常用于化學(xué)反應(yīng)、pcr反應(yīng)以及在細(xì)胞、組織和器官的保存中用作玻璃化低溫冷凍防護劑。DMSO用于細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基內(nèi),可以保護細(xì)胞免受冰晶引起的機械性損傷。它也可以用于主培養(yǎng)、亞培養(yǎng)、重組異倍體、雜交瘤等系列細(xì)胞株,胚胎干細(xì)胞(ESC)和造血干細(xì)胞的冷凍保藏。另外常常與BSA或FBS混合使用。
說明: 貨號:AMS0001 規(guī)格:500ml 產(chǎn)品簡介: 組織細(xì)胞中的大多數(shù)肽類激素、蛋白物質(zhì)為水溶性,在進行病理研究之前必固定。多聚甲醛能很好地保存組織的抗原性和細(xì)微結(jié)構(gòu),與福爾馬林相比更適用于小動物組織標(biāo)本的固定,也非常適合組織和細(xì)胞的光鏡病理或免疫化學(xué)研究。本產(chǎn)品為 4%多聚甲醛的緩沖溶液,pH 為中性。用于組織和細(xì)胞標(biāo)本的固定。操作說明:將組織標(biāo)本放入本產(chǎn)品中,固定 24h 左右即可。細(xì)胞爬片固定 15min 即可。保存條件:4度保存年,常溫6個月 ,拆封后建議4℃保存以保證更好的保存效果。
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